磷酸葡萄糖變位酶操作步驟 ：
1. 編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)
2. 加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照(標(biāo)準(zhǔn)品)50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復(fù) 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：重復(fù)操作同 3。
8. 洗滌：重復(fù)操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A 50μl，再加入顯色劑 B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色) 。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值) 。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類：除試劑盒特別說明外，一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有：血清和血漿（不同抗凝劑），細(xì)胞上清，和細(xì)胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用；
關(guān)鍵字：磷酸葡萄糖變位酶,試劑盒的檢測范圍：也就是標(biāo)曲范圍，特別要注意待測樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi)，對于濃度很高的樣本，可以先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。
關(guān)鍵字：磷酸葡萄糖變位酶,試劑盒中的稀釋線性及回收率：
a.稀釋線性一般指樣本稀釋線性，是將樣本梯度稀釋下來，看各稀釋梯度濃度是否成線性；參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的佳稀釋倍數(shù)；
b.稀釋線性也有做加標(biāo)稀釋線性的情況，加標(biāo)稀釋線性是將標(biāo)準(zhǔn)品加入樣本中測定加入的標(biāo)準(zhǔn)品濃度測定是否準(zhǔn)確；同樣也是確定待測樣本稀釋倍數(shù)的參考指標(biāo)。一般線性和回收率的范圍在80%-120%比較合適；
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關(guān)鍵字：磷酸葡萄糖變位酶,試劑盒的其它指標(biāo)：
a.靈敏度：試劑盒能夠檢測到的樣本低濃度的能力，如果待檢指標(biāo)含量很低，需要選擇高靈敏度的ELISA試劑盒；
b.板間和板內(nèi)的變異系數(shù)（CV%）:反映板內(nèi)和不同板之間是否均勻，CV%一般小于10% 比較好。
試劑盒的有效期：試劑盒的有效期一般是半年至一年，樣本準(zhǔn)備時間需要考慮到試劑盒的有效期。
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關(guān)鍵字：磷酸葡萄糖變位酶 用于體外診斷。試劑盒用于檢測與人體組織或細(xì)胞標(biāo)本。磷酸葡萄糖變位酶 適用范圍為冰凍切片和石蠟包埋組織切片，新準(zhǔn)備好的細(xì)胞，和固定的培養(yǎng)細(xì)胞。歡迎咨詢我司自產(chǎn)磷酸葡萄糖變位酶 。
（編輯：tanxi）