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CHO/dhFr-倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷
貨號:BY-1298
品牌:乾思細胞
規(guī)格:T25瓶
目錄價:詢價
商品詳情 相關(guān)下載
CHO/dhFr - 倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷簡介
CHO/dhFr - 倉鼠卵巢細胞是中國倉鼠卵巢細胞(CHO)的特殊突變株,因其缺乏二氫葉酸還原酶(DHFR)活性而得名。DHFR 是葉酸代謝途徑中的關(guān)鍵酶,負責催化二氫葉酸還原為四氫葉酸,后者參與 DNA、RNA 和蛋白質(zhì)的合成。該細胞系由于 DHFR 基因缺陷,無法在不含次黃嘌呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基中存活,這一特性使其成為基因工程和生物制藥領(lǐng)域**價值的工具細胞。
從生物學特性來看,CHO/dhFr - 細胞保留了 CHO 細胞的基本形態(tài)與生長特性,呈上皮樣貼壁生長,細胞形態(tài)多為多邊形或不規(guī)則形,在適宜條件下增殖能力較強,倍增時間約為 18 - 24 小時,可穩(wěn)定傳代,適合大規(guī)模培養(yǎng)。但由于缺乏 DHFR,細胞生長依賴外源提供的核苷酸前體(次黃嘌呤和胸腺嘧啶)。
在基因工程應(yīng)用中,CHO/dhFr - 細胞的 DHFR 缺陷特性成為篩選和擴增外源基因的有效手段。科研人員通常將編碼 DHFR 的基因與目的基因共同構(gòu)建到表達載體中,轉(zhuǎn)入 CHO/dhFr - 細胞后,將細胞置于不含次黃嘌呤和胸腺嘧啶且含有甲氨蝶呤(MTX)的培養(yǎng)基中篩選。MTX 是 DHFR 的強抑制劑,普通細胞會因 MTX 抑制 DHFR 活性導(dǎo)致核苷酸合成受阻而死亡,而成功轉(zhuǎn)入 DHFR 基因和目的基因的細胞則能夠利用 MTX 抗性存活并大量增殖,從而實現(xiàn)對目的基因陽性克隆的高效篩選。同時,逐步提高 MTX 濃度,會促使細胞通過增加 DHFR 基因拷貝數(shù)來抵抗 MTX 抑制,由于目的基因與 DHFR 基因共表達,從而顯著提高目的蛋白的表達水平。
在生物制藥領(lǐng)域,CHO/dhFr - 細胞發(fā)揮著舉足輕重的作用。全球眾多上市的治療性單克隆抗體、細胞因子、生長激素等生物藥均采用該細胞系生產(chǎn)。其優(yōu)勢在于能夠?qū)Ρ磉_的蛋白進行正確的折疊、糖基化等翻譯后修飾,生產(chǎn)出的重組蛋白藥物具有與天然蛋白相似的結(jié)構(gòu)和功能,且**性高、免疫原性低。此外,在基礎(chǔ)科研中,CHO/dhFr - 細胞也常用于研究基因表達調(diào)控機制、蛋白質(zhì)功能及細胞信號通路等,為生命科學領(lǐng)域的探索提供了重要的細胞模型。


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