Mouse podocyte 小鼠腎足細(xì)胞（含 tsSV40T 序列）
Mouse podocyte 小鼠腎足細(xì)胞（含 tsSV40T 序列）是腎臟研究領(lǐng)域的重要細(xì)胞模型，其通過(guò)將溫度敏感型大 T 抗原（tsSV40T）導(dǎo)入原代腎足細(xì)胞獲得，兼具永生化特性與足細(xì)胞的生物學(xué)功能，為探索腎臟疾病機(jī)制提供了有力工具。
這類(lèi)細(xì)胞具有典型的腎足細(xì)胞形態(tài)特征，在適宜條件下呈貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞伸出多級(jí)分支的足突，足突間相互交錯(cuò)形成濾過(guò)裂隙膜，模擬體內(nèi)腎臟濾過(guò)屏障結(jié)構(gòu)。含有的 tsSV40T 序列賦予其獨(dú)特的增殖特性：在 33℃允許溫度下，tsSV40T 抗原活化，細(xì)胞可快速增殖；轉(zhuǎn)移至 37℃限制溫度后，抗原失活，細(xì)胞逐漸恢復(fù)分化表型，表達(dá)足細(xì)胞特異性蛋白如 nephrin、podocin 等，用于模擬生理或病理狀態(tài)下的足細(xì)胞功能。
培養(yǎng) Mouse podocyte 細(xì)胞時(shí)，需使用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基，添加非必需氨基酸、丙酮酸鈉等營(yíng)養(yǎng)成分。細(xì)胞在 33℃、5% CO?環(huán)境下培養(yǎng)，當(dāng)密度達(dá) 80% - 90% 時(shí)傳代。為維持其分化特性，需定期將細(xì)胞置于 37℃培養(yǎng) 3 - 4 周，之后再轉(zhuǎn)回 33℃擴(kuò)增。凍存時(shí)使用含 10% DMSO 的凍存液，經(jīng)程序降溫后保存在液氮中。
在科研應(yīng)用上，該細(xì)胞株廣泛用于研究多種腎臟疾病。如在糖尿病腎病研究中，通過(guò)高糖處理模擬病理環(huán)境，觀察足細(xì)胞足突消失、nephrin 表達(dá)下調(diào)等損傷表型，探究疾病發(fā)生機(jī)制；在遺傳性腎病研究中，利用基因編輯技術(shù)敲低或過(guò)表達(dá)特定致病基因，分析其對(duì)足細(xì)胞功能和濾過(guò)屏障完整性的影響；此外，還可用于評(píng)估藥物對(duì)足細(xì)胞的保護(hù)作用，篩選潛在的腎臟疾病治療藥物。
Mouse podocyte 細(xì)胞（含 tsSV40T 序列）的優(yōu)勢(shì)在于，相比原代足細(xì)胞，其可長(zhǎng)期穩(wěn)定傳代，便于大規(guī)模實(shí)驗(yàn)；通過(guò)溫度調(diào)控能靈活切換增殖與分化狀態(tài)，利于模擬不同生理病理?xiàng)l件。但它也存在局限性，永生化過(guò)程可能導(dǎo)致部分基因表達(dá)改變，與體內(nèi)原代細(xì)胞存在一定差異；溫度轉(zhuǎn)換操作復(fù)雜，需嚴(yán)格把控培養(yǎng)條件，否則易影響細(xì)胞功能。
使用該細(xì)胞時(shí)，需定期檢測(cè)足細(xì)胞特異性蛋白表達(dá)，確保細(xì)胞分化狀態(tài)；嚴(yán)格遵循溫度轉(zhuǎn)換流程，避免頻繁傳代導(dǎo)致細(xì)胞老化。憑借獨(dú)特的生物學(xué)特性，Mouse podocyte 小鼠腎足細(xì)胞（含 tsSV40T 序列）在腎臟疾病機(jī)制探索與藥物研發(fā)中發(fā)揮著不可替代的作用。