Jurkat D,E 人 T 淋巴瘤細(xì)胞（Tet-on 基因修飾）
Jurkat D,E 人 T 淋巴瘤細(xì)胞（Tet-on 基因修飾）是在 Jurkat D,E 細(xì)胞的基礎(chǔ)上，利用 Tet-on 基因表達(dá)調(diào)控系統(tǒng)進(jìn)行修飾構(gòu)建的特殊細(xì)胞系。Jurkat D,E 細(xì)胞源自人 T 淋巴細(xì)胞白血病，而 Tet-on 系統(tǒng)的引入，使科研人員能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)特定基因表達(dá)的**調(diào)控，為研究基因功能和細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制提供了強(qiáng)大工具。
從細(xì)胞特性來看，Tet-on 基因修飾賦予了 Jurkat D,E 細(xì)胞獨(dú)特的基因表達(dá)調(diào)控能力。Tet-on 系統(tǒng)由四環(huán)素調(diào)控轉(zhuǎn)錄激活因子（rtTA）和四環(huán)素響應(yīng)元件（TRE）組成。在缺乏四環(huán)素或其衍生物（如強(qiáng)力霉素）時(shí)，rtTA 不能與 TRE 結(jié)合，下游目的基因處于沉默狀態(tài)；當(dāng)加入強(qiáng)力霉素后，rtTA 與 TRE 結(jié)合，從而啟動(dòng)目的基因的表達(dá)。通過這種方式，研究人員可以在時(shí)間和表達(dá)水平上**控制目的基因在 Jurkat D,E 細(xì)胞中的表達(dá)，模擬基因在不同生理或病理狀態(tài)下的表達(dá)變化。這種特性使得該細(xì)胞系能夠有效避免因基因持續(xù)表達(dá)對(duì)細(xì)胞造成的毒性影響，同時(shí)可動(dòng)態(tài)觀察基因表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡、信號(hào)傳導(dǎo)等生物學(xué)行為的影響。
在細(xì)胞培養(yǎng)方面，Jurkat D,E（Tet-on 基因修飾）細(xì)胞與普通 Jurkat D,E 細(xì)胞的基礎(chǔ)培養(yǎng)條件相似。常用含 10% 胎牛血清（FBS）的 RPMI 1640 培養(yǎng)基，添加適量抗生素防止污染，在 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)胞呈懸浮生長(zhǎng)，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 0.5×10? - 1×10? cells/mL 時(shí)，需進(jìn)行傳代，傳代比例一般為 1:3 - 1:5 。由于 Tet-on 系統(tǒng)的存在，在培養(yǎng)過程中如需調(diào)控基因表達(dá)，需根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)**添加或移除強(qiáng)力霉素。凍存時(shí)，采用含有 10% 二甲基亞砜（DMSO）、20% 胎牛血清的凍存液，將細(xì)胞置于液氮中保存，以維持細(xì)胞活性和 Tet-on 系統(tǒng)的功能完整性。
Jurkat D,E（Tet-on 基因修飾）細(xì)胞在科研領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。在基因功能研究中，科學(xué)家可以通過該細(xì)胞系研究特定基因在 T 淋巴細(xì)胞中的功能，以及其對(duì)細(xì)胞發(fā)育、免疫應(yīng)答的影響；在信號(hào)通路研究方面，可通過調(diào)控目的基因表達(dá)，分析相關(guān)信號(hào)通路的激活與傳導(dǎo)機(jī)制；此外，在藥物研發(fā)中，它能夠用于評(píng)估藥物對(duì)基因表達(dá)調(diào)控的影響，篩選靶向基因表達(dá)的新型藥物，為疾病治療提供新的策略和靶點(diǎn)。