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AR42J 大鼠胰腺外分泌細(xì)胞簡介

起源與背景

細(xì)胞特性

1. 形態(tài)與生長特性
   • 形態(tài)：貼壁生長，呈多邊形或上皮樣細(xì)胞形態(tài)，匯合時(shí)可形成鋪路石樣單層，具有典型的腺泡細(xì)胞特征（如胞質(zhì)豐富、嗜堿性顆粒）。
   • 增殖能力：永生性細(xì)胞系，可在體外穩(wěn)定傳代，但增殖速度較正常原代細(xì)胞稍慢，需定期傳代以維持活性（傳代周期通常為 3~5 天，密度達(dá) 80%~90% 時(shí)傳代）。
2. 功能特性
   • 外分泌功能模擬：雖為癌細(xì)胞系，但保留部分正常胰腺腺泡細(xì)胞的功能，如可合成和分泌消化酶（如淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶原等），但分泌能力低于原代腺泡細(xì)胞。
   • 激素響應(yīng)性：對(duì)促胰液素（Secretin）、膽囊收縮素（CCK）等胃腸激素敏感，可通過相應(yīng)受體激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路（如 cAMP、Ca2?信號(hào)），調(diào)控酶分泌和細(xì)胞增殖。
   • 病理模型特性：在炎癥因子（如 IL-1β、TNF-α）或化學(xué)刺激（如雨蛙素）作用下，可誘導(dǎo)類似急性胰腺炎的病理變化（如細(xì)胞水腫、炎癥因子釋放、腺泡細(xì)胞凋亡或壞死），因此常用于胰腺炎發(fā)病機(jī)制研究。

培養(yǎng)與保存

1. 培養(yǎng)條件
   • 培養(yǎng)基：常用含 10% 胎牛血清（FBS）的 Ham's F-12 培養(yǎng)基，或 DMEM/F12 混合培養(yǎng)基，添加 1% 青霉素 - 鏈霉素雙抗。
   • 環(huán)境：37℃、5% CO?恒溫培養(yǎng)箱，濕度 95% 以上，維持弱堿性 pH（7.2~7.4）。
   • 傳代方法：胰酶 - EDTA 消化法（0.25% 胰酶），消化時(shí)間約 2~3 分鐘，鏡下觀察細(xì)胞變圓后終止消化，離心收集細(xì)胞并重懸接種。
2. 凍存與復(fù)蘇
   • 凍存液：含 10% DMSO、20% FBS 的培養(yǎng)基，細(xì)胞密度調(diào)整為 1×10?~5×10? cells/mL，程序降溫后液氮保存。
   • 復(fù)蘇要點(diǎn)：快速解凍（37℃水浴 1 分鐘），輕柔離心去除凍存液，避免 DMSO 損傷細(xì)胞，接種后 24 小時(shí)更換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。

應(yīng)用領(lǐng)域

1. 胰腺外分泌功能研究
   • 分析消化酶（如淀粉酶）的合成、儲(chǔ)存和分泌機(jī)制，探究激素（如 CCK）對(duì)腺泡細(xì)胞的調(diào)控通路。
   • 研究胰腺腺泡細(xì)胞極性、細(xì)胞間連接（如緊密連接、間隙連接）的分子基礎(chǔ)。
2. 胰腺炎機(jī)制研究
   • 模擬急性胰腺炎的病理過程，分析炎癥因子、氧化應(yīng)激、鈣穩(wěn)態(tài)失衡等因素對(duì)腺泡細(xì)胞的損傷機(jī)制。
   • 篩選**藥物或抗氧化劑，評(píng)估其對(duì)腺泡細(xì)胞凋亡、壞死的保護(hù)作用（如通過檢測 LDH 釋放、caspase 活性等指標(biāo)）。
3. 胰腺癌相關(guān)研究
   • 雖非典型胰腺癌細(xì)胞系（更接近正常腺泡細(xì)胞惡變早期階段），但可用于研究胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）的早期轉(zhuǎn)化事件，或與其他胰腺癌細(xì)胞系（如 Panc-1、BxPC-3）對(duì)比分析。
   • 探索化療藥物（如吉西他濱）對(duì)胰腺外分泌細(xì)胞的毒性作用及耐藥機(jī)制。
4. 信號(hào)通路與分子機(jī)制研究
   • 常用于研究 Ca2?信號(hào)、MAPK 通路（如 ERK、JNK）、NF-κB 炎癥通路在胰腺細(xì)胞中的功能，以及轉(zhuǎn)錄因子（如 NFAT、AP-1）的調(diào)控作用。

局限性與注意事項(xiàng)

• 功能局限性：作為永生化細(xì)胞系，其外分泌功能（如酶分泌量）及病理反應(yīng)（如胰腺炎模型的嚴(yán)重程度）與原代腺泡細(xì)胞或體內(nèi)模型存在差異，需結(jié)合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。
• 批次差異：不同實(shí)驗(yàn)室保存的 AR42J 細(xì)胞可能因傳代次數(shù)或培養(yǎng)條件不同，導(dǎo)致功能特性（如激素響應(yīng)性）不一致，建議使用低代次細(xì)胞（<20 代）并定期驗(yàn)證。
• 污染風(fēng)險(xiǎn)：需警惕支原體污染（約 15% 的細(xì)胞系存在污染），建議定期進(jìn)行支原體檢測（如 PCR 法），并使用支原體清除劑（如 Mynox）處理。