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PT-67病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞
貨號:BY-0497
品牌:其它品牌
規(guī)格:T25瓶
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PT-67 病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞
PT-67 病毒轉(zhuǎn)染小鼠細(xì)胞是通過將 Moloney 小鼠白血病病毒(Mo-MLV)的包裝信號序列導(dǎo)入 NIH/3T3 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞而獲得的細(xì)胞系,在基因傳遞、病毒載體構(gòu)建等研究中具有獨特價值。
從生物學(xué)特性來看,PT-67 細(xì)胞呈貼壁生長,形態(tài)與原代 NIH/3T3 細(xì)胞相似,多為梭形或不規(guī)則多邊形,細(xì)胞間連接緊密。因其經(jīng)過病毒轉(zhuǎn)染改造,具備高效包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的能力。該細(xì)胞能夠穩(wěn)定表達(dá)病毒包裝所需的 gag、pol 和 env 基因產(chǎn)物,可將帶有目的基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體 RNA 包裝成具有感染能力的病毒顆粒。這些病毒顆??筛咝Ц腥径喾N細(xì)胞類型,實現(xiàn)外源基因的穩(wěn)定導(dǎo)入與表達(dá),為基因功能研究和基因治療提供了有力工具。此外,PT-67 細(xì)胞具有較強的增殖能力,細(xì)胞傳代穩(wěn)定,在合適培養(yǎng)條件下可快速生長,便于大量制備病毒載體。
培養(yǎng) PT-67 細(xì)胞需要特定的條件和方法。常用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,胎牛血清能為細(xì)胞生長提供豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子;同時添加 1% 的青霉素 - 鏈霉素混合液,防止微生物污染。細(xì)胞需在 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中生長,二氧化碳可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的 pH 值,維持細(xì)胞適宜的生存環(huán)境。在培養(yǎng)過程中,當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80% - 90% 時,使用 0.25% 胰蛋白酶 - 0.53mM EDTA 消化液進(jìn)行消化傳代。傳代時要嚴(yán)格控制消化時間,避免過度消化損傷細(xì)胞。由于 PT-67 細(xì)胞對血清質(zhì)量較為敏感,建議使用高質(zhì)量胎牛血清,以保證細(xì)胞活性和病毒包裝效率。此外,為防止細(xì)胞污染和維持其病毒包裝能力,需定期檢測支原體,并避免與其他細(xì)胞系交叉操作。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,PT-67 細(xì)胞應(yīng)用廣泛。在基因工程研究中,科研人員可利用該細(xì)胞包裝攜帶目的基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,用于基因過表達(dá)、基因敲低等實驗,研究基因在細(xì)胞生理、病理過程中的功能。在病毒學(xué)研究中,PT-67 細(xì)胞可用于研究病毒包裝機制、病毒與宿主細(xì)胞的相互作用等。在基因治療領(lǐng)域,以 PT-67 細(xì)胞包裝的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可作為基因遞送工具,將治療性基因?qū)牖颊呒?xì)胞,為遺傳性疾病、腫瘤等疾病的治療提供新的策略。此外,該細(xì)胞還可用于制備重組病毒疫苗,助力疫苗研發(fā)與抗病毒藥物篩選。

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