ECV-304人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

規(guī)格：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶

特點(diǎn)：細(xì)胞代數(shù)為2-3代

包裝：內(nèi)層無菌自封袋；專用防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書

細(xì)胞來源：ATCC、sciencell、DSMZ、ECACC、國(guó)內(nèi)

貨期：1-2周

運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸

 ECV-304人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

售后服務(wù)：

復(fù)旦大學(xué)提供原代/傳代細(xì)胞，質(zhì)量保證，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，沒有細(xì)菌 真菌 支原體等微生物污染。細(xì)胞一般以T25培養(yǎng)瓶包裝，容積75ml細(xì)胞數(shù)量可達(dá)10的6次方左右。購買方收到細(xì)胞應(yīng)當(dāng)馬上檢查，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不佳或者大部分死亡情況下，須當(dāng)天聯(lián)系我司。得到我技術(shù)確認(rèn)后免費(fèi)補(bǔ)發(fā)一株。一周內(nèi)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染情況，請(qǐng)拍照記錄并與銷售部聯(lián)系。

售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或E-mail致銷售人員，我們將盡快為您解決。

備注：剛收到細(xì)胞時(shí)，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天，利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài)，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，再調(diào)回10%即可。

細(xì)胞污染和補(bǔ)救方法：

一、菌污染

狀態(tài)：若細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)菌污染，肉眼觀察培養(yǎng)基會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基顏色變黃，渾濁，顯微鏡下觀察培養(yǎng)基，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中有黑色細(xì)沙狀的物體，有規(guī)律的移動(dòng)，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)影響明顯，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞裂解死亡。

<菌污染>

預(yù)防和補(bǔ)救：

1.保證細(xì)胞操作是處于完全無菌的狀態(tài)；

2.將培養(yǎng)箱徹底消毒滅菌，如使用84消毒液及75%酒精擦拭培養(yǎng)箱，另外需定期對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒處理；

3.將感染細(xì)菌的細(xì)胞及時(shí)丟棄，防止污染其他細(xì)胞。

二、霉菌及真菌污染

       狀態(tài)：肉眼觀察培養(yǎng)基發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基顏色基本無變化，不渾濁，但是培養(yǎng)基中由絮狀漂浮物，顯微鏡下觀察，若感染真菌可看到分叉細(xì)絲狀的結(jié)構(gòu)（不同種類結(jié)構(gòu)不同），若感染霉菌顯微鏡下可看到片狀的結(jié)構(gòu)，不透明，真菌及霉菌對(duì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)影響不大。

<真菌污染>

預(yù)防和補(bǔ)救：

     1.保證細(xì)胞房的干凈整潔，干燥的環(huán)境(潮濕的環(huán)境利于霉菌及真菌的生長(zhǎng))。

     2.控制外來人員進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室。

     3.對(duì)實(shí)驗(yàn)室及培養(yǎng)箱進(jìn)行徹底消毒。

     4.若細(xì)胞非常珍貴，且不易獲得，可以對(duì)污染的細(xì)胞采取如下操作。

     懸浮細(xì)胞：收集SCL-1 Cell并離心，用PBS漂洗，重復(fù)此操作數(shù)次。

     貼壁細(xì)胞：用PBS輕輕沖洗細(xì)胞，丟棄，重復(fù)此操作數(shù)次。

三、支原體感染

      狀態(tài)：在普通光學(xué)顯微鏡下無法觀察到支原體，需使用光學(xué)顯微鏡或者電鏡進(jìn)行觀察，細(xì)胞感染支原體后，生長(zhǎng)極其緩慢，形態(tài)不佳，培養(yǎng)基無明顯變化。

預(yù)防和補(bǔ)救：

       預(yù)防：實(shí)驗(yàn)室新購買的血清及培養(yǎng)基需檢測(cè)是否含有支原體，引進(jìn)的新品種細(xì)胞需做支原體檢測(cè)，向培養(yǎng)基中添加預(yù)防支原體的抗生素。

       補(bǔ)救：向培養(yǎng)基中添加抗生素，（如氧氟沙星10 μg/ml、環(huán)丙沙星10 μg/ml、卡那霉素20~50 μg/ml、四環(huán)素10~50 μg/ml、慶大霉素200μg/ml等抗生素），或者向培養(yǎng)基中添加支原體清除劑清除支原體數(shù)天。

四、黑蛟蟲

       狀態(tài)：在普通光學(xué)顯微鏡下可觀察到培養(yǎng)基中有許多黑點(diǎn)，但當(dāng)細(xì)胞密度大時(shí)，黑點(diǎn)會(huì)減少，培養(yǎng)基無明顯變化，一般不會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。黑膠蟲來源于血清中。

<黑蛟蟲污染>

       預(yù)防和補(bǔ)救：一般黑膠蟲不會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，可以嘗試改變培養(yǎng)基的品牌。血清凍融采取逐級(jí)凍融的方法。

五、原蟲感染

      狀態(tài)：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可用生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生，但會(huì)與SCL-1 Cell爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞占優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，zui終形成惡性循環(huán)。

<原蟲污染>

       影響細(xì)胞污染的因素很多，在我看來污染源主要是是細(xì)胞操作及細(xì)胞培養(yǎng)箱環(huán)境。這需要我們：

      1、提高細(xì)胞操作技巧，禁止交叉使用槍頭，在酒精燈火焰5公分距離內(nèi)操作。

      2、定期對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)箱消毒，培養(yǎng)箱水盤中的水也要定期更換，并使用無菌水。

      3、進(jìn)入細(xì)胞房之前及在無菌操作臺(tái)操作SCL-1 Cell實(shí)驗(yàn)之前需使用紫外燈照射30分鐘。

      4、每次開培養(yǎng)箱之前需用酒精消毒雙手。

      5、定期對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。

      6、配制的培養(yǎng)基需驗(yàn)證無菌后方可進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。